使用:5x
快速半干转缓冲液按照1:1:3=5x快转缓冲液:无水乙醇:去离子水的比例稀释成1x备用;使用枪头盒大小的容器浸泡滤纸时,每两张超厚滤纸可取15ml5x原液稀释成75ml的1x缓冲液使用。每块小型凝胶取两张超厚滤纸(约7.5x10cm大小,单张约2.4mm厚,也可用其他厚度规格堆叠成类似厚度)充分浸泡转印缓冲液10分钟;
随着半干转印系统不断进步,有越来越多的方法被应用于加速转印过程。例如,用户可以通过更换转印缓冲液、使用不同的转印装置,或调整转印条件、修改实验设计,从而缩短实验时间。这些方法对需要快速得到结果并做出正确判断的用户非常有用,比如从事临床检验工作的用户。使用传统半干转印方法过去通常需要40〜60分钟完成一次转印,而现在通过使用快速缓冲液,半干转印系统可以在7分钟之内完成蛋白质高效快速转印。可以通过较少的转移缓冲液实现快速和有效的转印,特别是在缩短筛选大量样品所耗时间方面,可在40〜60分钟内同时运行最多12块7×10cm的丙烯酰胺凝胶。此外,系统中配备镀铂钛阳极板和不锈钢阴极板,可实现高度均匀电场,使转印效果更均匀,机器使用寿命更长。
转印缓冲液为两电极间的化学环境提供电学连续性,从而在保持蛋白质溶解度的同时,不对蛋白质与固相转印膜的结合产生阻碍。转印缓冲液的成分会影响转印时间,使用通常传统实验用缓冲液在半干转印系统中,需要约40分钟转印样品,现在,使用快速半干转印缓冲液,实验证明通过半干转印系统只需在7〜10分钟内即可完成快速转印。